تبلیغات
دانلود فایل های کارشناسی ارشد - پایان نامه تولید نوروسفر از سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان

امروز:

پایان نامه تولید نوروسفر از سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان

تولید نوروسفر از سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان


هدف : هدف ما در این پژوهش پاسخ به این سوال است که  آیا MSCs  بعد از کشت طولانی مدت می­توانند به طورخود­بخودی به سلول­های پیش­ساز عصبی تمایز یابند.

مواد وروش­ها: این تحقیق شامل دو گروه می­باشد: کشت پاساژ پنجم MSCs  در محیط کشت -MEMα و  FBS %10  به مدت سه هفته بدون تعویض محیط یا استفاده از  القاگر به عنوان گروه آزمایشی و پاساژ پنجم MSCs بدون کشت طولانی مدت به عنوان گروه کنترل. سپس هر گروه توسط واکنش زنجیره­­ای پلیمراز(RT- PCR) به منظور بیان ژن­های فاکتور­های نوروتروفیک ( NGF، BDNF، NT3، NT4/5و GDNF) و ژن­های نورونی (Nestin،TH  وNurr1) ارزیابی شد. در این مطالعه، از ایمینوسیتوشیمی Nestin و βІІІ-tubulin  به منظور تعیین سلول­هایی که این نشانگر­ها را بیان می­کنند استفاده شد.

نتایج: پاساژ پنجم MSCs که از موش صحرایی بالغ استخراج شدند، بعد از کشت طولانی مدت (سه هفته) قادرند بطور خودبخودی به سلول­های شبه نوروسفری تمایز یابند و به نشانگر نستین پاسخ مثبت می­دهند. بعد از هفته دوم کشت، سلول­های شبه نورونی به نشانگر  βІІІ-tubulin واکنش مثبت نشان دادند. بررسی­های آماری نشان داده است که  MSCs در گروه آزمایشی افزایش معنی­داری از ژن­های فاکتور­های نوروتروفیک  NGF و  GDNFو ژن­های نورونی  Nestinو Nurr1 را نسبت به گروه کنترل نشان دادند    .(p<0.05)

نتیجه گیری:  در این مطالعه نشان داده شد که MSCs در کشت طولانی مدت، به طورخودبخودی به نوروسفر تمایز پیدا می­کنند بدون اینکه با فاکتور رشد یا القا­کننده خاص همراه شوند و قادرند ژن­های اختصاصی نورون­های دوپامینرژیک مانند  THو Nurr1را بیان کنند. مطالعات ما نشان می­دهد که  MSCsدر شرایط کشت طولانی مدت توانایی تمایز به سلول­های نورونی را به طور خودبخودی دارا هستند و پیشنهاد می­شود منبع سلولی مناسبی در درمان بیماری­های نورولوژیکی باشند.

کلید واژگان: سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان،کشت طولانی مدت، تمایز خودبخودی، نوروسفر

 

فهرست مطالب

 

 

عنوان صفحه

فصل اول: مقدمه. 1

مقدمه و مروری بر مطالعات گذشته. 1

1-1 سلول­های بنیادی جنینی.. 3

1-2 سلول­های بنیادی بالغ. 4

1-3 سلول­های بنیادی مغز استخوان. 5

1-3-1 مارکرهای سطحی خاص سلول­های بنیادی مزانشیمی.. 8

1-3-2 تنظیم سیستم ایمنی توسط سلول­های بنیادی مزانشیمی.. 8

1-3-3 پتانسیل تمایزی سلول­های بنیادی مزانشیمی.. 10

1-4 کاربرد درمانی سلول­های بنیادی مزانشیمی.. 14

1-5 انواع فاکتورهای رشد عصبی (NTFs) و ساختمان مولکولی گیرنده­های مربوط به آن­ها 17

1-5-1 فاکتورهای نوروتروفیک… 17

1-5-1-1 انواع فاکتور­های نوروتروفیک… 18

1-5-2 گیرنده­های مربوط به فاکتورهای رشد عصبی.. 20

1-5-2-1 ساختار گیرنده P75NTR و اتصال نوروتروفین.. 20

1-5-2-2 ساختار گیرنده Trk و اتصال نوروتروفین.. 22

1-6 سلول­های بنیادی عصبی.. 25

1-6-1 نوروسفر. 25

1-6-1-1 نوروسفر منبعی برای سلول درمانی.. 31

1-7 ضرورت اهداف تحقیق.. 33

فصل دوم: مواد و روش­ها. 35

2-2 تهیه و نگهداری حیوان آزمایشگاهی.. 36

2-2 جداسازی و کشت سلول­های بنیادی مغز استخوان موش صحرایی بالغ. 36

2-2-1 طرز تهیه محیط کشت    a-MEM.. 36

2-2-2 طرز تهیهPBS   فاقد کلسیم و منیزیم (2/7 : PH) 37

2-2-3 طرز تهیه تریپسین/ EDTA. 37

2-2-4 روش جداسازی و کشت سلول­های بنیادی مغز استخوان. 39

2-2-5 پاساژ سلولی.. 39

2-3 تأیید هویت سلول‌های استرومایی به روش ایمونوسیتوشیمی.. 39

2-3-1 ایمونوسیتوشیمی CD71. 40

2-3-1-1 طرز تهیه پارافرمالدئید 4%. 41

2-3-1-2 طرز تهیه ژلاتین 1/0 درصد. 41

2-3-1-3 ساخت سرم بز 10%. 41

2-3-1-4 طرز تهیه PBS  ایمنوسیتوشیمی (4/7 – 2/7 = PH). 42

2-3-1-5 طرز تهیه بافر گلیسرول.. 42

2-3-2 رنگ آمیزی آلکالین فسفاتاز 43

2-4بررسی مارکر عصبی  βIII-tubulin در سلول‌های مزانشیمی مغز استخوان  به روش ایمونوسیتوشیمی.. 44

 2-5 تایید هویت عصبی نوروسفر­ها به روش ایمونوسیتوشیمی.. 45

2-6 بررسی مولکولی بیان ژن­های اعضای خانواده نوروتروفین.. 46

2-6-1 استخراج RNA کل از سلول‌های کشت شده 46

2-6-2بررسی کمی و کیفی RNA استخراج شده 48

2-6-3 الکتروفورز ژل آگارز 49

2-6-4 واکنش ساخت cDNA (واکنش رونویسی معکوسRT-) 52

2-6-5 انتخاب پرایمر. 53

2-6-6 آماده‌سازی پرایمرها 54

2-6-7 واکنش PCR. 54

2-7 آنالیز آماری.. 58

فصل سوم: نتایج… 59

3-1 مشاهده مورفولوژی سلول‌های مزانشیمی مغز استخوان در شرایط کشت با میکروسکوپ اینورت.. 59

3-2 تعیین هویت سلول‌های مزانشیمی مغز استخوان با نشانگر CD71 و آلکالین فسفاتاز. 60

3-3 ویژگی­های مورفولوژیکی سلول‌های مزانشیمی مغز استخوان بعد از کشت طولانی مدت.. 60

3-4 تأیید هویت سلول‌های عصبی با استفاده از روش ایمونوسیتوشیمی.. 60

3-5 تأیید هویت نوروسفر­ها با استفاده از نشانگر نستین.. 61

3-6 ارزیابی بیان ژن­های فاکتورهای نوروتروفیک و مارکرهای نورونی و بررسی آماری شدت باند­ها و نمودار­های مربوط به آن 61

4-1 نتیجه­گیری و بحث 70

4-1 مورفولوژی سلول­های بنیادی مزانشیمی در کشت طولانی مدت و تایید هویت آن­ها 71

4-2 بیان فاکتورهای رشد عصبی به وسیله سلول­های بنیادی مزانشیمی.. 72

4-3 پتانسیل تمایز سلول­های بنیادی مغز استخوان به سلول­های عصبی.. 74

4-4 تولید نوروسفر از سلول­های بنیادی مغز استخوان در کشت طولانی مدت.. 76

4-5 نتیجه گیری.. 77

پیشنهادات.. 77

مراجع  

برای دانلود پایان نامه اینجا کلیک کنید


نوشته شده در : شنبه 12 تیر 1395  توسط : مدیر سایت.    نظرات() .

http://canadianopharmacy.com/
سه شنبه 8 مرداد 1398 10:38 ب.ظ

Cheers, I value this!
canadian online pharmacies legal canadian pharcharmy online canadian pharmacies without an rx canadian pharmacy world canadian prescriptions online online canadian pharmacy aarp recommended canadian pharmacies canadian pharmacies without an rx drugstore online shopping cialis from canada
prescription doctor cialis
دوشنبه 3 تیر 1398 07:48 ق.ظ

Whoa all kinds of superb tips!
order generic cialis online purchase once a day cialis il cialis quanto costa legalidad de comprar cialis cialis 100 mg 30 tablet cialis generico sialis achat cialis en itali canadian cialis cialis canadian drugs
where to buy cialis online forum
یکشنبه 2 تیر 1398 01:17 ق.ظ

You actually explained this superbly.
click here to buy cialis where cheapest cialis where do you buy cialis sialis cuanto cuesta cialis yaho how does cialis work dose size of cialis cialis patentablauf in deutschland wow cialis 20 click here take cialis
http://mesticen.strikingly.com/
شنبه 1 تیر 1398 08:17 ق.ظ

You have made your point very clearly.!
generic cialis levitra cialis authentique suisse cialis kaufen wo how much does a cialis cost cialis generico en mexico cialis mit grapefruitsaft cialis cipla best buy cialis patentablauf in deutschland best generic drugs cialis cialis 5 mg buy
Cialis pills
جمعه 31 خرداد 1398 03:58 ب.ظ

You've made the point!
cialis wir preise rezeptfrei cialis apotheke cialis patent expiration when will generic cialis be available cialis online cialis 20 mg cut in half cialis dosage recommendations cialis qualitat cialis dosage recommendations cialis generico online
http://tensterprib.strikingly.com/
جمعه 31 خرداد 1398 12:19 ق.ظ

Wow lots of helpful facts!
cialis usa cost cialis 100 mg 30 tablet link for you cialis price viagra or cialis cialis soft tabs for sale cialis manufacturer coupon cialis 5 effetti collaterali cialis kaufen bankberweisung only here cialis pills buy cialis online cheapest
venta de cialis canada
پنجشنبه 30 خرداد 1398 04:48 ق.ظ

Thank you! Excellent information.
sialis cialis 100mg suppliers tadalafil 20mg generic cialis levitra cialis para que sirve cialis efficacit cialis generika in deutschland kaufen prix cialis once a da cost of cialis per pill cialis tablets australia
Generic cialis
چهارشنبه 29 خرداد 1398 01:13 ب.ظ

Info nicely applied!.
canadian cialis cialis generisches kanada generic cialis soft gels try it no rx cialis tadalafil 10 mg i recommend cialis generico get cheap cialis cialis side effects cialis generico milano american pharmacy cialis
long term side effects of cialis
سه شنبه 28 خرداد 1398 08:44 ب.ظ

Fantastic postings. Thanks a lot!
price cialis per pill generic cialis acheter du cialis a geneve no prescription cialis cheap cialis canada american pharmacy cialis venta de cialis canada cialis generico lilly does cialis cause gout can i take cialis and ecstasy
Buy generic cialis
دوشنبه 27 خرداد 1398 10:57 ب.ظ

Kudos! I enjoy it!
only best offers cialis use cialis generika in deutschland kaufen precios de cialis generico cialis prezzo in linea basso click now buy cialis brand achat cialis en europe effetti del cialis warnings for cialis walgreens price for cialis pastillas cialis y alcoho
http://dietire.strikingly.com/
دوشنبه 27 خرداد 1398 07:46 ق.ظ

Thanks! I enjoy this.
cialis patentablauf in deutschland cialis with 2 days delivery cialis generisches kanada what is cialis cialis cipla best buy cialis 20mg preis cf cialis with 2 days delivery cialis sale online click here take cialis enter site very cheap cialis
Buy generic cialis
یکشنبه 26 خرداد 1398 03:49 ق.ظ

Terrific data. Regards.
we use it 50 mg cialis dose online prescriptions cialis look here cialis cheap canada cialis flussig when can i take another cialis cialis 20mg preis cf cialis generico cialis sale online cialis 20 mg tadalafil 5mg
http://enaxtrib.strikingly.com/
شنبه 25 خرداد 1398 02:07 ب.ظ

You stated it perfectly.
low dose cialis blood pressure cialis rezeptfrei sterreich cialis 10mg prix pharmaci cialis 5 mg scheda tecnica how much does a cialis cost buy cialis online nz prix de cialis cialis 20mg buy cialis uk no prescription prices for cialis 50mg
Buy cialis online
جمعه 24 خرداد 1398 09:30 ق.ظ

Information well used..
cialis for bph cialis daily dose generic cost of cialis cvs cialis 5 mg funziona buy name brand cialis on line cialis generico online buy cialis online nz acheter du cialis a geneve cialis 20mg prix en pharmacie deutschland cialis online
order cialis paypal
پنجشنبه 23 خرداد 1398 07:04 ب.ظ

Thanks a lot, Plenty of forum posts!

tadalafil generic we choice free trial of cialis cialis great britain cialis pas cher paris buying cialis overnight cialis italia gratis cialis sans ordonnance buy original cialis viagra vs cialis safe dosage for cialis
http://bercontstan.strikingly.com/
پنجشنبه 23 خرداد 1398 05:51 ق.ظ

Seriously plenty of helpful info.
generic cialis with dapoxetine cialis 20mg preis cf acquisto online cialis cialis patent expiration cialis generic tadalafil buy cialis online napol cialis dosage cialis tadalafil cialis free trial buy cialis online
http://writoutten.strikingly.com/
چهارشنبه 22 خرداد 1398 03:45 ب.ظ

You actually explained it exceptionally well.
effetti del cialis only now cialis for sale in us cialis patent expiration we use it cialis online store online cialis cialis 5 mg para diabeticos female cialis no prescription cialis tadalafil canadian cialis wow cialis 20
cialisvie.com
دوشنبه 20 خرداد 1398 09:18 ق.ظ

Appreciate it! A good amount of posts!

generic cialis in vietnam buy original cialis female cialis no prescription cialis price in bangalore cialis daily tarif cialis france generic cialis review uk low dose cialis blood pressure female cialis no prescription cialis daily reviews
over the counter viagra rite aid
یکشنبه 19 خرداد 1398 09:14 ق.ظ

Great post. I used to be checking continuously this weblog and I'm impressed! Extremely useful info particularly the final part :) I maintain such info a lot. I was looking for this particular information for a long time. Thanks and good luck.
http://cialisvie.com/
یکشنبه 19 خرداد 1398 03:30 ق.ظ

Whoa many of good material!
cialis pills cialis cuantos mg hay miglior cialis generico cialis dosage amounts import cialis cialis 20 mg cost cialis authentique suisse we use it 50 mg cialis dose generic cialis at the pharmacy what is cialis
prix viagra france
شنبه 18 خرداد 1398 03:00 ب.ظ

When I initially commented I clicked the "Notify me when new comments are added" checkbox and now each time a comment is added I get four e-mails with the same comment. Is there any way you can remove people from that service? Thanks!
http://canadiantousapharmacy.com/
چهارشنبه 21 فروردین 1398 07:13 ب.ظ

Amazing plenty of good advice!
trust pharmacy canada reviews canadian pharmacies canadian pharmacies without an rx canada medication cost drugstore online canada northwest pharmacies canada drug canada online pharmacies medication canadian medications list canadian online pharmacy
buy cialis online us pharmacy
جمعه 16 آذر 1397 02:21 ق.ظ

Lovely data, Thanks.
cialis 30 day trial coupon only now cialis 20 mg 5 mg cialis pharmacie en ligne callus cialis for bph cuanto cuesta cialis yaho click here take cialis can i take cialis and ecstasy 200 cialis coupon buy cialis sample pack
Buy cialis
پنجشنبه 15 آذر 1397 06:57 ق.ظ

Nicely put. Thanks a lot.
cialis pills prezzo cialis a buon mercato cialis super acti tadalafil american pharmacy cialis cialis 30 day trial coupon walgreens price for cialis cialis australia org buy original cialis usa cialis online
Buy generic cialis
چهارشنبه 14 آذر 1397 12:17 ب.ظ

You revealed that exceptionally well.
cialis sale online cialis canada on line generic cialis pill online no prescription cialis cheap tadalafilo cialis daily reviews we use it cialis online store cialis 10mg prix pharmaci buy brand cialis cheap buying cialis overnight
Cialis generic
چهارشنبه 14 آذر 1397 12:50 ق.ظ

With thanks, Numerous stuff.

link for you cialis price comprar cialis navarr generic cialis levitra prezzo cialis a buon mercato cialis rezeptfrei sterreich weblink price cialis only best offers 100mg cialis wow look it cialis mexico cialis online deutschland costo in farmacia cialis
Buy generic cialis
سه شنبه 13 آذر 1397 01:50 ب.ظ

Nicely put. Kudos.
we recommend cialis best buy cialis generico in farmacia purchase once a day cialis cialis prezzo al pubblico does cialis cause gout 200 cialis coupon how much does a cialis cost tadalafil generic cialis generic cialis tadalafil online
Buy generic cialis
سه شنبه 13 آذر 1397 02:24 ق.ظ

With thanks! Great information!
cialis qualitat buying cialis on internet cialis kaufen bankberweisung cialis cipla best buy cialis online napol 40 mg cialis what if i take cialis price in bangalore cheap cialis how do cialis pills work cialis pills price each
Generic cialis
دوشنبه 12 آذر 1397 01:21 ب.ظ

Awesome advice. Thanks a lot!
cialis generic tadalafil buy cialis dosage recommendations cialis venta a domicilio achat cialis en suisse cialis online nederland opinioni cialis generico cialis generika i recommend cialis generico ou trouver cialis sur le net prix de cialis
Buy cialis
دوشنبه 12 آذر 1397 02:06 ق.ظ

With thanks! I value it.
low dose cialis blood pressure we like it cialis soft gel venta cialis en espaa prices for cialis 50mg canada discount drugs cialis prezzo cialis a buon mercato acquisto online cialis tadalafil 20 mg brand cialis nl cialis generico en mexico
 
لبخندناراحتچشمک
نیشخندبغلسوال
قلبخجالتزبان
ماچتعجبعصبانی
عینکشیطانگریه
خندهقهقههخداحافظ
سبزقهرهورا
دستگلتفکر
نمایش نظرات 1 تا 30